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發(fā)光菌冷藏復蘇技術在水質(zhì)毒性在線監(jiān)測的應用

時間:2022-04-06 09:15:31   訪客:682

水質(zhì)毒性在線監(jiān)測儀的核心問題之一是儀器在線運行過程中發(fā)光菌的生物活性保持穩(wěn)定,這樣才能保證儀器連續(xù)監(jiān)測的可靠性。本儀器系統(tǒng)中,檢測組件的低溫儲藏罐可以快速冷藏高活性發(fā)光菌。由于發(fā)光菌在5℃的冷藏環(huán)境下謝作用緩慢,而一旦轉(zhuǎn)移到20℃環(huán)境復蘇時,在較短的時間內(nèi)可以恢復正常生理活性。在培養(yǎng)基中接種明亮發(fā)光桿菌,20℃下增菌擴大培養(yǎng)12h,放入5℃環(huán)境下冷藏。在線復蘇方法是用檢測組件的注射泵和六位閥,先把了冷藏菌液泵入盤管預加溫,待溫度平衡后,再泵入生物反應器中。

通過對明亮發(fā)光菌和費氏弧菌的靜態(tài)培養(yǎng),構建了發(fā)光生長曲線,掌握了發(fā)光的生長規(guī)律,并且可以確定在 12~15h的培養(yǎng)時間段為發(fā)光的對數(shù)生長期,也就是活性好、發(fā)光穩(wěn)定的時期。為復蘇試驗和毒性試驗提供了詳細的理論依據(jù),選取該時期的發(fā)光進行相關試驗可以減小菌液這一因素造成的誤差。

從構建的明亮發(fā)光桿菌和費氏弧菌的生長曲線中可以得出結論:明亮發(fā)光桿菌的發(fā)光強度比費氏弧菌的要大1倍左右,所以在本文研究中選擇明亮發(fā)光菌作為主要試驗菌種。為今后的費氏弧菌檢測、基因工程菌檢測積累數(shù)據(jù)和經(jīng)驗,為實現(xiàn)毒性在線監(jiān)測儀的多通道實時監(jiān)測奠定基礎。

為了能夠源源不斷地提供儀器檢測時所需的高活性發(fā)光菌菌液,設計了多種活性控制方案,通過試驗終確定明亮發(fā)光菌冷藏復蘇技術作為優(yōu)的方案。冷藏復蘇技術能夠?qū)崿F(xiàn)在短時間內(nèi)使低溫冷藏環(huán)境下的發(fā)光恢復到預定發(fā)光狀態(tài)。但是可以進行這種有效復蘇的冷藏天數(shù)只能是10天以內(nèi),冷藏保存10天以上的在復蘇后的發(fā)光強度不夠穩(wěn)定。本項目的后期研究應該從降低冷藏溫度或者添加適當量的營養(yǎng)物質(zhì)等方面來延長的有效保存時間。


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